病理科

HP 测定药敏试剂盒标准操作规程

一、标本接收

1) 检查培养基盖子有无拧紧，有无漏液现象；

2) 检查胃粘膜有无浸泡在培养液中；

3) 检查胃粘膜是否含肉红色腺腔（见附图1）

4) 接收含胃粘膜标本的培养基后，应立即置35~37℃恒温培养，72小时后逐日观察培养液颜色

及浊度变化；

附图1：

二、分离培养基结果判读

5) 培养3－5 天，若HP 分离培养液变红且有明显细小紫红色颗粒，颗粒间液体清亮，提示有

HP 生长；当目测生长至高峰期时，可进行测定药敏试验；

6) 培养5 天后HP 分离培养液保持黄色澄清透明（无变化），表明无HP 生长，可判ＨＰ培养阴性。

三、行药敏时机

当分离培养基一旦变红有颗粒时，一般延长培养2天后达到高峰期，即可行药敏试验。附HP

生长示意图：

四、HP 测定药敏型操作步骤

1. 试剂及工具准备

1) HP阳性培养物准备；

2) 取出储存在0℃以下的HP药敏培养液、微孔板、CAT反应液、封孔膜，恢复至室温；

3) 微量移液器50-100微升量程、配套无菌吸嘴备用；

4) 超净工作台/安全柜内操作。

2. 测定药敏

1) 剪开微孔板的铝铂袋包装，取出微孔板，打开板盖；

2) Ur-孔加空白无菌的HP药敏培养液100ul，作为脲酶阴性对照及无菌对照；

3) 用无菌吸嘴将HP分离培养液中的阳性培养物吹打分散（约40-60下，目的为将颗粒吹打均匀，

吹打过程中控制不产生气泡），Ur+孔及CAT孔加阳性培养物50ul，CAT孔再滴入CAT反应液1滴，

CAT孔在15分钟内观察结果，板盖上作好标记；

4) 取阳性培养物100ul加至HP药敏培养液中混匀，接种GC孔及抗生素孔100ul/孔；

5) 将不干胶膜平整贴于整个药敏微孔板面；

6) 盖回板盖，放至35~37℃恒温箱中培养48-72小时，期间GC孔生长时，即可进行判读。

3. 判读A/0

1) 测定：Ur-孔呈黄色，Ur+孔变紫红色，CAT孔产生气泡，表明分离菌株为HP，其它反应谱为非

HP；

2) 药敏：结果应在GC孔明显红浊时判读。低、高浓度孔均不变红浊，判敏感（S）；低浓度孔变

红浊，高浓度孔不变，判中敏（M）；低、高浓度孔均变红浊，判耐药（R）。